сентября
13
Выращивание бактерий на жидкой питательной среде
При выращивании бактерий на жидкой питательной среде наблюдается придонный, диффузный или поверхностный (в виде пленки) рост культуры.
Рост периодической культуры бактерий подразделяют на несколько фаз, или периодов: 1) лаг-фаза; 2) фаза логарифмического роста; 3) фаза стационарного роста, или максимальной концентрации бактерий; 4) фаза гибели бактерий.
Эти фазы можно изобразить графически в виде отрезков кривой размножения бактерий, отражающей зависимость логарифма числа живых клеток от времени их культивирования. Лаг-фаза (от англ. lag — запаздывание) — период между посевом бактерий и началом их размножения. Продолжительность лаг-фазы составляет в среднем 4—5 ч. Бактерии при этом увеличиваются в размерах и готовятся к делению, повышается количество нуклеиновых кислот, белка и других компонентов клетки. Фаза логарифмического (экспоненциального) роста является периодом интенсивного деления бактерий продолжительностью около 5—6 ч. При оптимальных условиях роста бактерии могут делиться каждые 20—40 мин (время генерации — интервал между делениями клетки). Во время этой фазы бактерии наиболее ранимы, что объясняется высокой чувствительностью интенсивно растущей клетки к ингибиторам синтеза белка, нуклеиновых кислот и др. Затем наступает фаза стационарного роста, при которой количество жизнеспособных клеток остается без изменений, составляя максимальный уровень (М-кон-центрация). Ее продолжительность выражается в часах и колеблется в зависимости от вида бактерий, особенностей их культивирования. Рост бактерий завершается фазой гибели, характеризующейся отмиранием клеток в условиях истощения источников питательной среды и накопления в ней продуктов метаболизма бактерий. Продолжительность этой фазы колеблется от десятков часов до нескольких недель. Интенсивность роста и размножения бактерий зависит от многих факторов, в том числе от оптимального состава питательной среды, окислительно-восстановительного потенциала, рН, температуры и др.
Если к бактериям постоянно добавлять питательную среду и одновременно удалять продукты обмена, можно поддерживать бактериальную культуру в логарифмической фазе роста. Для этого применяют хемостат.